Еден чекор Брза RT-qPCR сонда Premix-UNG
Бр. мачка: HCR5143A
Комплет со сонда со еден чекор RT-qPCR (FOR FAST) е комплет за брзо откривање RT-qPCR базиран на сонда, погоден за квантитативна PCR со еден-плекс или мултиплекс користејќи РНК како шаблон (како што е РНК вирус).Овој производ користи нова генерација на Taq DNA полимераза модифицирана со антитела и реверзна транскриптаза посветена во еден чекор, со оптимизиран пуфер за брзо засилување, кој има поголема брзина на засилување, поголема ефикасност и специфичност на засилување.Поддржува балансирано засилување и во еднослојни и во мултиплекс примероци со ниска и висока концентрација за кратко време.
Компоненти
1. 5×RT-qPCR бафер (U+)
2. Ензимска мешавина (U+)
Белешки:
а.5×RT-qPCR пуфер (U+) вклучува dNTP и Mg2+;
б.Ензимската мешавина (U+) вклучува обратна транскриптаза, Hot Start Taq DNA полимераза, RNase инхибитор и UDG;
в.Користете совети без RNase, EP цевки итн.
Пред употреба, темелно измешајте го пуферот 5×RT-qPCR (U+).Ако има некакви врнежи по одмрзнувањето, почекајте пуферот да се врати на собна температура, измешајте и растворете, а потоа користете ги нормално.
Услови за чување
Производот се испорачува со сув мраз и може да се чува на -25~-15℃ 1 година.
Инструкции
1. Реакција Систем
| Компоненти | Волумен (20 μL реакција) |
| 2 ×RT-qPCR пуфер | 4 μL |
| Ензимска мешавина (U+) | 0,8 μL |
| Primer Forward | 0,1~ 1,0μM |
| Обратно прајмер | 0,1~ 1,0μM |
| TaqMan сонда | 0,05~0,25μM |
| Шаблон | X μL |
| Вода без RNase | до 25 μL |
Забелешки: Волуменот на реакција е 10-50μL.
2. Протокол за велосипедизам (Стандард)
| Циклус чекор | Темп. | Време | Циклуси |
| Обратна транскрипција | 55 ℃ | 10 мин | 1 |
| Почетна денатурација | 95 ℃ | 30 сек | 1 |
| Денатурација | 95 ℃ | 10 сек | 45 |
| Греење/продолжување | 60 ℃ | 30 сек |
| Протокол за возење велосипед (Брзо) Циклус чекор |
Темп. |
Време |
Циклуси |
| Обратна транскрипција | 55 ℃ | 5 мин | 1 |
| Почетна денатурација | 95 ℃ | 5 с | 1 |
| Денатурација | 95 ℃ | 3 с | 43 |
| Греење/продолжување | 60 ℃ | 10 с |
Белешки:
а.Температурата на обратна транскрипција е помеѓу 50℃ до 60℃, зголемувањето на температурата помага да се засилат сложените структури и шаблоните со висока содржина на CG;
б.Оптималната температура на жарење треба да се прилагоди врз основа на вредноста на Tm на прајмерот и да се избере најкраткото време за собирање на флуоресцентен сигнал врз основа на инструментот во реално време PCR.
Белешки
Ве молиме носете ја потребната ППЕ, како лабораториски мантил и ракавици, за да го осигурате вашето здравје и безбедност!
