Алкална фосфатаза (ALP)
Опис
Алкалната фосфатаза е изведена од рекомбинантен сој на E. coli кој го носи генот TAB5.Ензимот ја катализира дефосфорилацијата на 5' и 3' краевите на ДНК и РНК фосфомоноестерите.Исто така, ја хидролизира рибозата, како и деоксирибонуклеозидните трифосфати (NTPs и dNTPs).TAB5 алкалната фосфатаза делува на 5' испакнати, 5' вдлабнати и тапи краеви.Фосфатазата може да се користи во многу апликации за молекуларна биологија, како што е клонирање или означување на крајот на сонда за отстранување на фосфорилираните краеви на ДНК или РНК.Во експериментите за клонирање, дефосфорилацијата ја спречува линеаризираната плазмидна ДНК од самолигирање.Исто така, може да ги деградира неинкорпорираните dNTP во PCR реакции за да подготви шаблон за секвенционирање на ДНК.Ензимот целосно и неповратно се инактивира со загревање на 70°C во тек на 5 минути, со што е непотребно отстранувањето на фосфатазата пред врзувањето или означувањето на крајот.
Употреба
1.Алкалната фосфатаза споена со протеини (антитела, стрептавидин итн.) може конкретно да ги идентификува целните молекули и може да се користи во ELISA, WB и хистохемиска детекција;
2.Алкалната фосфатаза може да се користи за дефосфоризација на 5'-терминалот на ДНК или РНК за да се спречи самоповрзување;
3. Горенаведената дефосфорилирана ДНК или РНК може да се означат со радио-означени фосфати (преку Т4 поли-нуклеотид киназа)
Хемиска структура
Спецификација
| Тест предмети | Спецификации |
| Ензимска активност | 5 U/μL |
| Активност на ендонуклеаза | Не е откриен |
| Активност на егзонуклеаза | Не е откриен |
| Активност за никање | Не е откриен |
| Активност на RNase | Не е откриен |
| ДНК на E.coli | ≤1 копија/5U |
| Ендотоксин | LAL-тест, ≤10EU/mg |
| Чистота | ≥95% |
Транспорт и складирање
Транспорт:Амбиент
Складирање:Да се чува на температура од 2-8°C
Препорачано повторно тестирањеЖивотот:2 година
