Комплет за екстракција на вирусна ДНК/РНК
Овој комплет е погоден за брзо екстракција на вирална ДНК/РНК со висока чистота од примероци како што се назофарингеални брисеви, брисеви од околината, супернатанти од клеточна култура и ткивни хомогенатни супернатанти.Комплетот се заснова на технологија за прочистување на силика мембрана која ја елиминира потребата од користење органски растворувачи на фенол/хлороформ или таложење на алкохол кој одзема многу време за да се извлече вирална ДНК/РНК со висок квалитет.Добиените нуклеински киселини се без нечистотии и се подготвени за употреба во низводно експерименти како што се обратна транскрипција, PCR, RT-PCR, PCR во реално време, секвенционирање на следната генерација (NGS) и Northern blot.
Услови за складирање
Да се чува на 15 ~ 25 ℃ и да се транспортира на собна температура
Компоненти
| Компоненти | 100 RXNS |
| Бафер VL | 50 мл |
| Бафер RW | 120 мл |
| ddH2 O без RNase | 6 ml |
| Колони FastPure RNA | 100 |
| Цевки за колекција (2ml) | 100 |
| Цевки за колекција без RNase (1 .5ml) | 100 |
Бафер VL:Обезбедете средина за лиза и врзување.
Бафер RW:Отстранете ги преостанатите протеини и другите нечистотии.
ddH2O без RNase:Елутирај ДНК/РНК од мембраната во спин колоната.
Колони FastPure RNA:Специфично адсорбирајте ДНК/РНК.
Цевки за колекција 2 ml:Соберете го филтратот.
Цевки за колекција без RNase 1,5 ml:Собери ДНК/РНК.
Апликации
Назофарингеални брисеви, брисеви од околината, супернатанти на клеточна култура и ткивни хомогенирани супернатанти.
Самоподготвен Матералишта
Врвови за пипети без RNase, 1,5 ml центрифугачки цевки без RN-аза, центрифуга, мешалка за вител и пипети.
Процес на експериментирање
Направете ги сите следни чекори во кабинет за биосигурност.
1. Додадете 200 μl од примерокот во цевка за центрифугирање без RNase (надополнете со PBS или 0,9% NaCl во случај на недоволен примерок), додадете 500 μl од Buffer VL, добро измешајте со вртлог 15 – 30 секунди и центрифугирајте накратко да се собере смесата на дното на тубата.
2. Ставете ги FastPure РНК колони во колекционерски цевки од 2 ml.Префрлете ја смесата од чекор 1 во колони FastPure RNA, центрифугирајте на 12.000 вртежи во минута (13.400 × g) 1 мин и фрлете го филтратот.
3. Додадете 600 μl пуфер RW во колоните FastPure RNA, центрифугирајте на 12.000 вртежи во минута (13.400 × g) 30 секунди и фрлете го филтратот.
4. Повторете го чекор 3.
5. Центрифугирајте ја празната колона со 12.000 вртежи во минута (13.400 × g) 2 мин.
6. Внимателно префрлете ги колоните FastPure RNA во нови епрувети за колекција без RNase од 1,5 ml (обезбедени во комплетот) и додадете 30 – 50 μl ddH2O без RNase во центарот на мембраната без да ја допирате колоната.Оставете да отстои на собна температура 1 мин и центрифугирајте на 12.000 вртежи во минута (13.400 × g) 1 мин.
7. Отфрлете ги колоните FastPure RNA.ДНК/РНК може да се користи директно за последователни анализи или да се чува на -30~ -15°C за краток период или -85~-65°C подолг период.
Белешки
Само за истражувачка употреба.Не се користи во дијагностички процедури.
1. Однапред израмнете ги примероците на собна температура.
2. Вирусите се многу заразни.Ве молиме проверете дали се преземени сите неопходни безбедносни мерки пред експериментот.
3. Избегнувајте повеќекратно замрзнување и одмрзнување на примерокот, бидејќи тоа може да доведе до деградација или намален принос на екстрахираната вирусна ДНК/РНК.
4. Самоподготвената опрема вклучува врвови за пипети без RNase, цевки за центрифуга без RN-аза од 1,5 ml, центрифуга, мешалка за вител и пипети.
5. Кога го користите комплетот, носете лабораториски слој, ракавици од латекс за еднократна употреба и маска за еднократна употреба и користете потрошен материјал без RNase за да го минимизирате ризикот од контаминација со RNase.
6. Изведете ги сите чекори на собна температура освен ако не е поинаку наведено.
Механизам и тек на работа
