Bst 2.0 ДНК полимераза (без глицерол, висока густина)
Bst ДНК полимераза V2 е изведена од Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I, која има 5'→3' ДНК полимеразна активност и силна активност за замена на синџирот, но нема 5'→3' егзонуклеазна активност.Bst DNA Polymerase V2 е идеално погодна за поместување на низата, LAMP за изотермално засилување (Изотермално засилување со посредство на јамка) и брзо секвенционирање.Оваа Bst ДНК полимераза V2 е способна да ја инхибира активноста на ДНК полимеразата на собна температура, така што може да се работи и да се формулира системот за реакција на собна температура, спречувајќи неспецифично засилување и подобрување на ефикасноста на реакцијата, а оваа верзија може биде лиофилизиран.Покрај тоа, тој е способен да ја ослободи својата активност при покачени температури, со што се елиминира потребата за посебен чекор за активирање.
Компоненти
| Компонента | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNA полимераза V2 (без глицерол) (32U/μL) | 0,05 мл | 0,25 мл | 2,5 мл |
| 10×HC Bst V2 пуфер | 1,5 мл | 2×1,5 мл | 3×10 ml |
| MgSO4 (100 мм) | 1,5 мл | 2×1,5 мл | 2×10 ml |
Апликации
1.LAMP изотермално засилување
2.Реакција на единечно поместување на ДНК
3.Секвенционирање на гените со висок GC
4.ДНК секвенционирање на нанограмско ниво.
Состојба на чување
Транспортирајте под 0°C и да се чува на -25°C~-15°C.
Дефиниција на единицата
Една единица е дефинирана како количина на ензим што инкорпорира 25 nmol dNTP во материјал нерастворлив во киселина за 30 минути на 65°C.
Реакција на светилка
| Компоненти | 25 μLСистем |
| 10×HC Bst V2 пуфер | 2,5 μL |
| MgSO4 (100 мм) | 1,5 μL |
| dNTP (по 10 mM секој) | 3,5 μL |
| SYTO™ 16 Зелено (25×)a | 1,0 μL |
| Мешавина на прајмерb | 6 μL |
| Bst DNA полимераза V2 (без глицерол) (32 U/uL) | 0,25 μL |
| Шаблон | × μL |
| ddH2O | До 25 μL |
Белешки:
1) а.SYTOTM 16 Зелено (25×): Според експерименталните потреби, други бои може да се користат како замена;
2) б.Мешавина на прајмер: добиена со мешање на 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2,5 µM F3, 2,5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB и други волумени.
Реакција и состојба
1 × HC Bst V2 пуфер, температурата на инкубација е помеѓу 60°C и 65°C.
Деактивирање на топлина
80°C, 20 мин.
