Реагенс за ослободување на примерок
Реагенсот за ослободување примерок е за молекуларни POCT дијагностички сценарија.За двата системи на директно засилување LAMP и директно засилување PCR, нема потреба од екстракција на нуклеинска киселина.Суровиот лизат на примерокот може директно да се засили, целниот ген може точно да се открие, времето за откривање на примерокот може дополнително да се скрати, што совршено се совпаѓа со барањата за примена на молекуларната POCT.Погоден е за назални брисеви, брисеви од грло и други типови примероци.Обработените примероци може директно да се користат за откривање на квантитативно PCR или LAMP со флуоресценција во реално време, а истите резултати како и конвенционалните методи на екстракција може да се постигнат без комплицирани операции за екстракција на нуклеинска киселина.
Услови за чување
Транспортирајте и складирајте на собна температура.
Контрола на квалитет
Функционална детекција - квантитативна qPCR: Системот за реагенс за ослободување примерок од 800 μl беше засилен
со 1000 копии Нов псевдовирус, еден примерок од брис од нос, што резултира со слични криви на засилување иΔCt вредности во рамките на ± 0,5 Ct.
Експериментална постапкарез
1. Земете 800 μl Реагенс за ослободување на примерокот и размачкајте го растворот за лиза во епрувета за земање примероци од 1,5 mL
2. Земете го брисот од нос или брис од грло со брисот;Постапка за земање примероци од брис од нос: земете го стерилниот брис и ставете го во ноздрите, полека напредувајте до околу 1,5 cm длабочина, нежно ротирајте 4 пати против носната слузница повеќе од 15 секунди , потоа повторете ја истата операција на другата носна шуплина со истиот брис. Постапка за земање примероци од брис од грло: земете го стерилниот брис и нежно, брзо избришете ги фарингеалните крајници и задниот фарингеален ѕид 3 пати.
3.Ставете го брисчето веднаш во цевката за земање примероци.Главата на брис треба да се ротира и да се меша во растворот за складирање најмалку 30 секунди за да се осигура дека мострата е целосно елуирана во цевката за земање мостри.
4. Инкубација на собна температура (20 ~ 25 ℃) за 1 минута, подготовката на пуферот за лиза е завршена.
5. И 25μl системот RT-PCR и RT-LAMP беа компатибилни со 10μl количина на додаток на шаблон за експерименти за откривање.
Белешки
1. Минималната количина на примерок директен лизат што одговара на еден брис може да се прилагоди на 400 μl, што може да се прилагоди според потребите за тестирање.
2. Откако примерокот ќе се обработи со реагенсот за ослободување на примерокот, се препорачува да се спроведе следната фаза на тест што е можно поскоро, интервалот на чекање е пожелно помал од 1 час.
3. pH вредноста на лизатот на примерокот е кисела, а системот за детекција треба да има одреден пуфер.Погоден е за повеќето PCR, RT-PCR и LAMP откривање на флуоресценција со pH пуфер, но не е погоден за колориметриско откривање LAMP без пуфер.
