Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Опис
Број на мачка: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix е мултиплекс квантитативен PCR комплет базиран на РНК како шаблон.Во експериментот, обратна транскрипција и квантитативна ПЦР се изведуваат во истата реакциона цевка, со што се поедноставува експерименталната операција и се намалува ризикот од контаминација.Уникатниот дизајн на пуфер и ензимска мешавина може да се користи во лиофилизиран систем во еден чекор.Комплетот користи обратна транскриптаза отпорна на топлина за ефикасна синтеза на cDNA од првата нишка со користење на Hotstart Taq DNA полимераза за квантитативно засилување.Содржи оптимизиран реакционен пуфер, мешање на ензими итн., а додадени се фактори кои ефикасно го инхибираат неспецифичното PCR засилување и ја зголемуваат ефикасноста на засилување на повеќекратните qPCR реакции, овозможувајќи повеќекратно флуоресцентно квантитативно засилување, истовремено обезбедувајќи ја ефикасноста на засилување на прајмерите.
Компоненти
| Име |
| 1. Lyo-Buffer |
| 2. Лио-ензимска мешавина |
| 3. Lyo protectant |
Транспортна состојбајон
О: Лио-тампон и заштитно средство: -25~-15℃, рокот на траење е 1 година.
Б: Лио-ензимска мешавина, 2-8 ℃, рокот на траење е 6 месеци.
Упатство за работа
1. Систем за реакција (земи 25μL како пример)
| Компоненти | Волумен (μL) | Конечна концентрација |
| Лио-Буфер | 6 | 1* |
| Лио-ензимска мешавина | 1 | - |
| Lyo-Protectant | 8 | - |
| Мешавина за прајмер (10μM) | 1 | 0,1- 1 uM |
| Мешавина на сонда (10μM) | 0,5 | 0,05-0,5uM |
| Шаблон за РНК | 5 | - |
| DEPC H2O | До 25 | - |
2. Оптимизиран протокол за возење велосипед
1) Стандарден протокол за велосипедизам
| Фаза на реакција | Температура | Време | Циклус | |
| 1 | Обратна транскрипција | 50°Ca | 10 мин | 1 |
| 2 | Почетна денатурација | 95°C | 5 мин | 1 |
| 3 | Реакција на засилување | 95°C | 15 сек | 45 циклуси |
| 60°Cb | 30 секc |
2) Протокол за брз велосипед
|
| Фаза на реакција | Температура | Време | Циклус |
| 1 | Обратна транскрипција | 50°Ca | 2 мин | 1 |
| 2 | Почетна денатурација | 95°C | 2 секунди | 1 |
| 3 | Реакција на засилување | 95°C | 1сек |
45 циклуси |
| 60°Cb | 13 секc |
Забелешка:
a) Обратно транскрипција: Температурата може да избере 42°C или 50°C за 10-15 минути.
b) Реакција на засилување: Температурата се прилагодува според вредноста на Tm на дизајнираните прајмери.
в)Флуоресценција сигнал стекнување: Ве молиме поставете ја експерименталната процедура според барањата наприрачник за инструменти.
Технички информации/спецификации
| Топол почеток | Вграден топол старт |
| Метод на откривање | Откривање со прајмер-сонда |
| PCR метод | Еден чекор RT-qPCR |
| Вид на примерок | РНК |
Белешки
1. Овој производ е само за истражувачка употреба.
2. Ве молиме носете ја потребната ППЕ, како лабораториски мантил и ракавици, за да се обезбеди вашето здравје и безбедност!
