Рнасе А
Рибонуклеазата A(RNaseA) е едноверижен полипептид кој содржи 4 дисулфидни врски со молекуларна тежина од околу 13,7 kDa.RNase е ендорибонуклеаза која специфично разградува едноверижна РНК на C и U остатоци.Поточно, расцепувањето ја препознава фосфодиестерската врска формирана од 5'-рибозата на нуклеотидот и фосфатната група на 3'-рибозата на соседниот пиримидински нуклеотид, така што 2,3'-цикличните фосфати се хидролизираат до соодветните3 нуклеозидни фосфати (на пр., pG-pG-pC-pA-pG се расцепува со RNase A за да се генерираат pG-pG-pCp и A-PG).РНаза А е најактивна во расцепувањето на едноверижна РНК.Препорачана работна концентрација е 1-100 μ G/mL, компатибилна со различни системи за реакција.Ниска концентрација на сол (0-100 mM NaCl) може да се користи за сечење на едноверижна РНК, двоверижна РНК и РНК синџири формирани со хибридизација на РНК-ДНК.
Меѓутоа, при висока концентрација на сол (≥0,3 M), RNase A само специфично ја расцепува едноверижна РНК.
РНаза А најчесто се користи за отстранување на РНК при подготовка на плазмидна ДНК или геномска ДНК.Без разлика дали DNase е активна за време на процесот на подготовка може лесно да влијае на реакцијата.Традиционалниот метод на вриење во водена бања може да се користи за деактивирање на активноста на DNase.Овој производ не содржи DNase и протеаза и не бара термичка обработка пред употреба.Покрај тоа, овој производ може да се користи и во експерименти со молекуларна биологија, како што се анализа на заштита на RNase и анализа на секвенца на РНК.
Услови за складирање
Производот треба да се чува на -25℃~-15℃ 2 години.
Спецификации
| Изглед | Прашок |
| Квантитет | 100 mg / 1 g |
| Тип на производ | RNase A |
Инструкции
Ова е еден од вообичаените методи за подготовка на раствор за складирање RNase A.Може да се подготви исо други методи според традиционалните методи во лабораториската или референтната литература (како на прдиректно растворање во 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 или раствор Tris-NaCl)
1. Користете 10 mM натриум ацетат (pH 5,2) за да подготвите 10 mg/mL раствор за складирање RNase A.
2. Греење на 100 ℃ 15 мин.
3. Изладете на собна температура, додадете 1/10 волумен од 1 M Tris-HCl (pH 7,4), прилагодете ја неговата pH на 7,4 (зана пример, додадете 500 mL од 10 mg/mL RNase раствор за складирање 1 M Tris-HCl, pH7,4).
4. Под-спакуван на -20℃ за замрзнато складирање, кое може да биде стабилно до 2 години.
[Белешки]:
При вриење на растворот на RNaseA во неутрални услови, ќе се формира таложење на RNase;Варете го на пониска pH вредност, а доколку има врнежи, може да се забележат, што може да биде предизвикано од присуството на протеински нечистотии.Ако се најде талог по вриење, нечистотиите може да се отстранат со центрифугирање со голема брзина (13000 вртежи во минута), а потоа да се подспакува за складирање на замрзнување.
Белешки
Ве молиме носете ја потребната ППЕ, како лабораториски мантил и ракавици, за да се обезбеди вашето здравје и безбедност.
