Robustart Taq DNA полимераза

Robustart Taq ДНК полимеразата е ДНК полимераза со топла почеток.Овој производ не само што може подобро да ја инхибира неспецифичната реакција предизвикана од неспецифично жарење на прајмери ​​или агрегација на прајмери ​​во процесот на подготовка и засилување на системот PCR.Затоа, има одлична специфичност и е поефективен за засилување на шаблони со ниска концентрација, а погоден е и за мултиплексирана реакција на засилување на PCR.Покрај тоа, овој производ има многу добра применливост и стабилни резултати од засилување може да се добијат во различни типови на PCR реакции.

Компоненти

1.5 U/μL Robustart Taq DNA полимераза

2.10 × PCR пуфер II (бесплатно Mg²+) (опционално)

3.25 mM MgCl₂(изборен)

* 10 × PCR пуфер II (бесплатно Mg²+) не содржи dNTP и Mg²+, ве молиме додадете dNTPs и MgCl₂при подготовка на системот за реакција.

Препорачани апликации

1.Брзо засилување.

2.Повеќекратно засилување.

3.Директно засилување на крв, брисеви и други примероци.

4.Откривање на респираторни заболувања.

Состојба на чување

-20°C за долгорочно складирање, треба добро да се измеша пред употреба, избегнувајте често замрзнување-одмрзнување.

*Ако се појават врнежи по ладење, тоа е нормално;се препорачува да се изедначи на собна температура пред мешање и употреба.

Дефиниција на единицата

Една активна единица (U) е дефинирана како количество ензим што инкорпорира 10 nmol деоксирибонуклеотид во материјал нерастворлив во киселина на 74°C за 30 минути користејќи активирана ДНК на сперма од лосос како шаблон/прајмер.

Контрола на квалитет

1.SDS-PAGE електрофоретска чистота поголема од 98%.

2.Чувствителност на засилување, контрола од серија во серија, стабилност.

3.Нема егзогена нуклеазна активност, нема егзогена ендонуклеаза или контаминација со егзонуклеаза

Инструкции

Поставување реакција

Белешки:

1) а.Баферот не содржи dNTP и Mg²+, ве молиме додадете dNTP и MgCl₂при подготовка на системот за реакција.

2) б.Доколку се користи за qPCR/qRT-PCR, флуоресцентните сонди треба да се додадат во системот за реакција.Вообичаено, конечната концентрација на прајмер од 0,2 μM ќе даде добри резултати;ако перформансите на реакцијата се слаби, концентрацијата на прајмерот може да се прилагоди во опсег од 0,2-1 μM.Концентрацијата на сондата обично се оптимизира во опсег од 0,1-0,3 μM.Може да се изведат експерименти со концентрационен градиент за да се најде најдобрата комбинација на прајмер и сонда.

Протокол за термички циклус

Белешки

1.Стапката на засилување на брзата ДНК полимераза не треба да биде помала од 1 kb/10 s.Стапката на пораст и паѓање на температурата, режимот на контрола на температурата и ефикасноста на спроводливоста на топлина на различни PCR инструменти се многу различни, па затоа се препорачува да се оптимизираат оптималните услови за реакција за конкретниот брз PCR инструмент.

2.Системот е многу прилагодлив, со поголема специфичност и чувствителност.

3.Погоден за употреба како реагенси за откривање на PCR со висока чувствителност и може да се користи во реакции за засилување на мултиплекс PCR.

4.5'→3' полимеразна активност, 5'→3' егзонуклеазна активност;нема 3'→5' егзонуклеазна активност;нема функција за лекторирање.

5.Погоден за квалитативно и квантитативно тестирање на PCR и RT-PCR.

6.3' крајот на PCR производот е A, кој може директно да се клонира во T вектор.

7.Методот во три чекори се препорачува за прајмери ​​со ниски температури на жарење или за засилување на фрагменти подолги од 200 bp.