Ултра нуклеаза GMP-одделение
Мачка бр: HC2016A
UltraNuclease GMP-одделение се изразува и прочистува во Escherichia coli (E.coli) со генетски инженеринг и подготвен во GMP средини.Може да ја намали вискозноста на клеточниот супернатант и клеточниот лизат во научните истражувања, да ја зголеми ефикасноста на прочистувањето на протеините и да го подобри функционалното истражување на протеините.Производот, исто така, може да ги намали остатоците од нуклеинската киселина на домаќинот до pg-одделение, подобрувајќи ги перформансите и безбедноста на биолошките производи на апликации, вклучувајќи прочистување на вируси, производство на вакцини и фармацевтско производство на протеини/полисахариди.Покрај тоа, производот може да се примени и за да се спречи згрутчување на мононуклеарни клетки од човечка периферна крв (PBMC) при клеточна терапија и развој на вакцини.
УлтраНуклеазата се обезбедува во форма на стерилизиран реагенс, елуиран во пуфер (20mM Tris-HCL pH 8,0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% глицерин), со изглед на безбојна, проѕирна течност.Овој производ е произведен според барањата за процесот на GMP и се обезбедува во течна форма.
Компоненти
UltraNuclease GMP-одделение (250 U/μL)
Услови за чување
Производот се испорачува со сув мраз и може да се чува на -25℃~-15°C две години.
Ако производот е отворен и се чувал на 4℃ повеќе од една недела, препорачуваме филтрирањепроизводот за да се спречи микробна контаминација.
Спецификации
| Домаќин на изразување | Рекомбинантна E. coli со ген UltraNuclease |
| Молекуларна тежина | 26,5 kDa |
| електроелектрична точка | 6,85 |
| Чистота | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Бафер за складирање | 20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% глицерин |
|
Дефиниција на единицата | Дефиницијата за една единица активност (U) е количината на ензимот што се користи запроменете ја вредноста на апсорпција на ΔA260 за 1,0 за 30 минути во 2.625 mLсистем за реакција на 37℃ со pH од 8,0 (еквивалентно на целосно варење на37 μg ДНК на сперма од лосос во олигонуклеотиди). |
Инструкции
1. Примерок Колекција
Прилепени клетки: отстранете го медиумот, измијте ги клетките со PBS и отстранете го супернатантот.
Ќелии за суспензија: собирајте ги клетките со центрифугирање, измијте ги ќелиите со PBS, центрифугирајте на 6000вртежи во минута за 10 мин, соберете го пелето.
Ешерихија коли: соберете ги бактериите со центрифугирање, измијте еднаш со PBS, центрифугирајте на 8.000вртежи во минута за 5 мин, и соберете го пелетот.
2. Третман со примероци
Третирајте ги собраните клеточни пелети со пуфер за лиза во однос на маса (g) до волумен (mL) 1: (10-20), или со механички или хемиски методи на мраз или на собна температура (1 g клеточен пелети содржи околу
109 клетки).
3. Ензимски третман
Додадете 1-5 mM MgCl во системот за реакција и прилагодете ја pH вредноста на 8-9.
Додадете UltraNuclease според односот од 250 единици за да се вари 1 g клеточни пелети, инкубирајте на 37℃ повеќе од 30 минути.Ве молиме погледнете го формуларот „Препорачано време на реакција“ за да го изберетевреметраењето на третманот.
4. Супернатант Колекција
Центрифугирајте со 12.000 вртежи во минута 30 минути и соберете го супернатантот.
Забелешка: Ако растворот е кисел или алкален, или содржи високи концентрации на сол, детергенти илиденатуранти, ве молиме зголемете ја дозата на ензимот или соодветно продолжете го времето на лекување.
Препорачани услови за реакцијана
| Параметар | Оптимална состојба | Ефективна состојба |
| Mg² + Концентрација | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Температура | 37℃ | 0-42℃ |
| Концентрација на DTT | 0-100 mM | >0 mM |
| Концентрација на меркаптоетанол | 0-100 mM | >0 mM |
| Моновалентна концентрација на катјони | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Концентрација на фосфат лон | 0-10 mM | 0-100 mM |
Препорачано Реакција Време (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Количина на ултрануклеаза (конечна концентрација) | Време на реакција |
| 0,25 U/mL | > 10 ч |
| 2,5 U/mL | > 4 ч |
| 25 U/mL | 30 мин |
Белешки:
Ве молиме носете ја потребната ППЕ, како лабораториски мантил и ракавици, за да го осигурате вашето здравје и безбедност!
