DNase I (бесплатно Rnase) (2u/ul)
Бр. мачка: HC4007B
DNase I е ендонуклеаза која може да вари едноверижна или двоверижна ДНК.Може да хидролизира фосфодиестерски врски за да произведе моно-и олигодеоксинуклеотиди кои содржат 5'-фосфатна група и 3'-OH група.Оптималниот работен опсег на pH на DNase I е 7-8.Активноста на DNase I зависи од Ca2+а може да се активира со двовалентни метални јони како CO2, Мн2+, Zn2+итн. Во присуство на Mg2+, DNase I може по случаен избор да расцепи кое било место на двоверижна ДНК;Додека во присуство на Мн2+, DNase I може да ја расцепи ДНК двоверижна на истото место, формирајќи тапи краеви или лепливи краеви со испакнати 1-2 нуклеотиди.Може да се користи за обработка на различни примероци на РНК.
Компоненти
Име | 1KU | 5KU |
Рекомбинантна DNaseI (без RNase) | 500 μL | 5 × 500 μL |
Бафер за реакција на DNase I (10×) | 1 мл | 5 × 1 ml |
Услови за складирање
Овој производ треба да се чува на -25~-15℃ 2 години.Ве молиме избегнувајте повеќекратно замрзнување-одмрзнување.
Инструкции
Применето за отстранување на ДНК од примероците на РНК само за референца.
1. Ве молиме користете цевки за центрифугирање без RNase и врвови за пипети за да го подготвите следниов систем за реакција:
Компоненти | Волумен (μL) |
Бафер за реакција на DNase I (10×) | 1 |
Рекомбинантен DNasel (без RNase) | 1 |
РНК | X |
ddH без RNase2O | До 10 |
2. Условите за реакција се следни: 37℃, по 15-30 минути, додадете конечна концентрација од 2,5 mM EDTA раствор и добро измешајте, а потоа 65℃ 10 минути.Обработениот шаблон може да се користи за последователни RT-PCR или RT-qPCR експерименти, итн.
Белешки
1. DNase l е чувствителна на физичка денатурација;При мешање, нежно превртете ја епрувета идобро протресете, не тресете силно.
2. Ензимот треба да се чува во кутија за мраз или на ледена бања кога се користи и треба да се чува на -20℃ веднаш по употребата.
3. Овој производ е само за истражувачка употреба.
4. Ве молиме работете со лабораториски мантили и ракавици за еднократна употреба, за ваша безбедност.